方案 | 单细胞混悬液制备-酶解法

概况

高通量单细胞测序技术对样本的要求很高，需要将样本制备成高质量的单细胞悬液才能进行后续实验。但实体组织多种多样，根据不同实体组织成分的特点可以选择不同的分散细胞的方法。常用的制备单细胞混悬液有酶解法，机械法和化学处理法。在处理不同组织时，需要摸索合适方法，尽可能采用对细胞损伤小，产率较高的制备方法，最大限度地保持细胞原有特性。

酶解法利用特定酶进行相应的化学反应除掉一些特定结构，尤其适合将小块组织消化成为单个细胞，常规消化需要在一定的时间和温度下进行振荡操作，样品量一般在 1 ~ 2 ml 左右。

测试条件

样品 水

仪器 MATRIX Orbital Delta F2.0 恒温混匀仪

混匀 关闭

温度 37 °C

样品量 1.8 ml * 24

实验步骤

1. 使用水作为测试样品，来验证仪器的控温效果。

2. 在 MATRIX Orbital Delta F2.0 恒温混匀仪中加入 1.8 ml 水，设定 37 ℃，选择 Fast 控温模式。

3. 使用第三方温度探头测试水的温度稳定性和均一性。

结果

> 温度均一性为 6 个点的最大温度偏差

> 温度准确性为 6 个点与设定值的最大偏差

> 该测试未开启混匀功能

结论

1. 不同的酶消化反应，对温度以及消化时间要求不同, 合适的消化酶以及设备能大大加快细胞解离速率，也有利于获得更高的细胞产量。酶解法在细胞分离中适用范围广，是分离方法的推荐选折。

2. IKA 恒温混匀仪 MATRIX Orbital Delta 系列可用于酶解法中的消化反应。高通量、精确控温、定时，可调混匀速度保证高质量单细胞混悬液的制备。

关于IKA

IKA 集团是实验室前处理、分析技术、 工业混合分散技术的市场leader。电化学合成仪、磁力搅拌器、顶置式搅拌器、分散均质机、混匀器、恒温摇床、恒温培养箱/烘箱、移液器、研磨机、旋转蒸发仪、加热板、恒温循环器、粘度计、量热仪、生物反应器、化学合成釜、实验室反应釜等相关产品构成了IKA 实验室前处理与分析技术的产品线；而工业技术主要包括用于规模生产的混合设备、分散乳化设备、捏合设备、以及从中试到扩大生产的整套解决方案。IKA 还与全球zhi名大学和科学家进行着密切的合作, 支持其在科研道路上不断探索。我们致力于为客户提供更好的技术, 帮助客户获得成功。

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